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龍圖騰網恭喜海南省種業實驗室申請的專利一種椰子小孢子體胚培養過程中的抗褐化方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN119522832B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-18發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202510096267.3，技術領域涉及：A01H4/00；該發明授權一種椰子小孢子體胚培養過程中的抗褐化方法是由穆治華;羅杰;維吉塔-羅西尼-馬德里庫馬里-維德哈那拉齊;瑪拉瓦-譚斯麗格-奈普利-因迪拉查帕;塞納拉斯-帕斯蘭那赫拉齊-那沃蒂尼-查素麗卡-加亞拉斯那;楊壯;周駿杰;肖勇;夏薇;劉賢青設計研發完成，并于2025-01-22向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種椰子小孢子體胚培養過程中的抗褐化方法在說明書摘要公布了：本申請涉及一種椰子小孢子體胚培養過程中的抗褐化方法，屬于椰子組織培養技術領域。本申請的椰子小孢子體胚培養過程中的抗褐化方法，包括以下步驟：S1、花藥采集與預處理；S2、花藥觀察、消毒與分離；S3、花藥培養與胚胎培養。本申請所提供的椰子小孢子體胚培養過程中的抗褐化方法，在培養基中加入PVP對抗椰子小孢子胚胎誘導過程中的褐化現象；且在切割外植體時蘸取檸檬酸溶液來降低物理傷害引發的褐化；還在培養基中添加抗壞血酸（維生素C）來調節pH，同時對抗褐化現象；此外還使用低濃度TDZ（噻苯隆）作為誘導激素，提高胚胎誘導效率。

本發明授權一種椰子小孢子體胚培養過程中的抗褐化方法在權利要求書中公布了：1.一種椰子小孢子體胚培養過程中的抗褐化方法，其特征在于，包括以下步驟：S1、花藥采集與預處理：選擇椰子樹冠上最新開放的花序作為1號花序，并按照花序開放順序依次命名2號花序、3號花序、4號花序以此類推，在1號花序開放1周后，使用手鋸，從根部完整采集4號花序，并迅速噴灑檸檬酸溶液，然后用濕潤干凈的紙巾包裹切口避免迅速褐化；使用干凈手術刀切開花序佛焰苞，摘取花序主穗軸中部的小穗，其內部含有2-3個雄花花藥，將小穗進行預處理，用高壓滅菌鍋滅菌的紙巾包裹經預處理后的全部小穗，用無菌水噴濕濕紙巾后包裹全部小穗，并用鋁箔紙完全覆蓋，放入聚丙烯袋并用橡皮筋扎緊兩端袋口，將聚丙烯袋放于培養箱預處理一周；S2、花藥觀察、消毒與分離：在預處理后，打開聚丙烯袋，并剔除外皮褐化、萎蔫、外皮開裂的雄花粒，對花藥進行觀察，待觀察到成熟球狀小孢子后，則取出健康新鮮、呈乳白色、長度為5-7mm的雄花粒進行消毒處理，消毒完畢后放入鋪有濾紙的玻璃培養皿并晾干，進行外植體切割處理，將切出的花藥的創口再次蘸取檸檬酸溶液，放在鋪有濾紙的玻璃培養皿晾干備用；S3、花藥培養與胚胎培養：將10-20個花藥背面朝上，創口向下插入M1培養基的培養皿中進行第一次培養，并露出一半方便觀察，待體胚突破花藥壁露出培養基表面后，將體胚轉移到M2培養基進行第二次培養，待長出成熟不透明小芽后移至光環境中進行植株培養；步驟S3中，所述M1培養基中含有：TDZ0.5mgL、蔗糖120gL、抗壞血酸100mgL、PVP5gL、瓊脂7gL、硝酸鉀1900mgL、硝酸銨1650mgL、磷酸二氫鉀170mgL、硫酸鎂370mgL、氯化鈣440mgL、碘化鉀0.83mgL、硼酸6.2mgL、硫酸錳22.3mgL、硫酸鋅8.6mgL、鉬酸鈉0.25mgL、硫酸銅0.025mgL、氯化鈷0.025mgL、乙二胺四乙酸二鈉37.3mgL、硫酸亞鐵27.8mgL、肌醇100mgL、甘氨酸2.0mgL、鹽酸硫胺素0.1mgL、鹽酸吡哆醇0.5mgL、煙酸0.5mgL，其pH值為5.75；步驟S3中，所述M2培養基中含有：6-芐基腺嘌呤5μM、赤霉素0.5μM、抗壞血酸100mgL、PVP5gL、瓊脂7gL、硝酸鉀1900mgL、硝酸銨1650mgL、磷酸二氫鉀170mgL、硫酸鎂370mgL、氯化鈣440mgL、碘化鉀0.83mgL、硼酸6.2mgL、硫酸錳22.3mgL、硫酸鋅8.6mgL、鉬酸鈉0.25mgL、硫酸銅0.025mgL、氯化鈷0.025mgL、乙二胺四乙酸二鈉37.3mgL、硫酸亞鐵27.8mgL、肌醇100mgL、甘氨酸2.0mgL、鹽酸硫胺素0.1mgL、鹽酸吡哆醇0.5mgL、煙酸0.5mgL，其pH值為5.75；步驟S2中，所述外植體切割處理的具體過程為：將200mgL的無菌檸檬酸溶液置于玻璃培養皿上，液面距底部2mm，在60倍顯微鏡下，使用一次性手術刀小心撥開并去除雄花的三片花萼并打開花蕾，用細尖鑷子將花藥從花絲上分離，在花藥根部切斷花絲組織，且少留創口。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人海南省種業實驗室，其通訊地址為：572000 海南省三亞市崖州區崖州灣科技城宜居路7號1棟；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。